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小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

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小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存 詳細(xì)資料

小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說(shuō)明書(shū)》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱:小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱: LT-E4 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測(cè)抗體、
(四)競(jìng)爭(zhēng)法。
小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。

    英文名稱:    Muskgrassphenol    :    89-83-8    分子式:    50.22    分子量:    C0H4O
藍(lán)    英文名稱:    Muskgrassphenolblue    :    76-6-9    分子式:    466.59    分子量:    C27H30O5S
砷鐵    分子式:    205.69    分子量:    As2Fe    英文名稱:    Arseniciron    :    2006-2-2
升麻素    英文名稱:    Cimifugin    :    3792-38-3    分子式:    306.32    分子量:    C6H8O6
升麻素苷    英文名稱:    Prim-o-glucosylcimifugin    :    8068-45-4    分子式:    468.452    分子量:    C22H28O
生根粉    英文名稱:    Rootingpowder    :    9873982    分子式:        分子量:    
酰    分子式:    258.34    分子量:    C0H8N4O2S    英文名稱:    Bio-Hydrazine    :    66640-86-6
圣草次苷    英文名稱:    TimeofSt    :    3463-28-0    分子式:    596.53398    分子量:    C27H32O5
十八烷    分子式:    330.59    分子量:    C24H42    英文名稱:    Eighteenbenzene    :    4445/7/2
十二環(huán)嗎啉    分子式:    28.48    分子量:    C8H35NO    英文名稱:    Twelvemorpholinering    :    593-77-7
十二氯三鈦鋁    分子式:    596.2    分子量:    AlCl2Ti3    英文名稱:    Twelvechlorinethreetitanium    :    2003-3-3
十二烷(硬型)(支鏈異構(gòu)體類的混合物)    分子式:    246.43    分子量:    C8H30    英文名稱:    Twelvealkyl(hard)(mixtureofbranchedchainisomers)    :    25265-78-5
十二烷氯吡    分子式:    283.8798    分子量:    C7H30ClN    英文名稱:    Twelvealkylchloride    :    39549-68-
十二烷溴吡    分子式:    328.33    分子量:    C7H30BrN    英文名稱:    Twelvealkylbromide    :    04-73-4
十九    英文名稱:    Nineteenacid    :    646-30-0    分子式:    298.5    分子量:    C9H38O2
十六氟酞菁銅    分子式:    863.93    分子量:    C32CuF6N8    英文名稱:    十六氟酞菁銅    :    496-87-ATP 硫酸化酶    0U    
電泳尿素    00g    
蛋白去除試劑 S    3g     
4- 甲基傘形酮    0g    
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX74 DNA/Hinc Ⅱ    50 次    
預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (43.0-200.0 KD)    0 次    
T4 RNA 連接酶    000U    
卵白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,2mg/mL    mL    
小鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存克必隆 RACE 試劑盒    0 次    
30525-    蛋白磷酸酶抑制劑混合液 2    mL
00873-00    電泳尿素    00g
柱式植物油 DNAout    50 次    
008-50    非酶多糖清除劑 (DNA )    50 次
CAS4306-25-3    植酸    0g
30602-00    Vent DNA 聚合酶    00U
00868-500    SDS-PAGE 分離膠配膠液    500mL
CAS0043-35-3    硼酸    500g

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