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大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書 詳細資料

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大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

Rat EyePrimaCell:Normal Corneal Epithelial Cells

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大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒【Rat EyePrimaCell:Normal Corneal Epithelial Cells】
     大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書大鼠角膜是唯的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能。分三層細胞層,外層即是上皮細胞。其中,角膜上皮細胞能參與先天性免疫,能感應病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng)。角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶,防止UV-和4-羥基壬烯醛對細胞造成傷害。大鼠角膜上皮細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的角膜組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的角膜組織能使得角膜組織中上皮細胞的一些功能特性發(fā)生改變,從而將上皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠角膜上皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養(yǎng)的上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的角膜上皮細胞。本試劑盒包含: ()OptiTDSTM組大鼠角膜上皮細胞織解離液(3×ml) (2)大鼠角膜上皮細胞組織處理緩沖液(00ml) (3)FibrOutTM大鼠角膜上皮細胞成纖維抑制劑(ml(500X)) (4)大鼠角膜上皮組織洗液(5 x 00 ml) (5)大鼠角膜上皮細胞生長因子(ml500X)及血清(5x0ml) (6)大鼠角膜上皮細胞基礎培養(yǎng)基(5 x 00ml) (7)大鼠角膜上皮組織預備液( x 00 ml) (8)大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟:
大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

PCNA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IF  IP   ICC/IF    50 µg

erpinF2 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

Coagulation Factor VIII / FVIII / F8 抗體 (Heavy Chain), 兔單抗 ELISA    50 µg

CRELD 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

STMN / Stathmin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Pancreasin / Marapsin / PRSS27 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD59 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test

ITGA6 & ITGB Heterodimer 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

LDLR / LDL Receptor 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CD48 / SLAMF2 / BCM 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 µg

大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書哈巴苷英文名稱:Harpagide分子式:364.35分子量:C5H24O0:835927

2,3,9,0,6,7,23,24-八氟酞菁銅(II)(升華純)分子式:720.0英文名稱:2,3,9,0,6,7,23,24 -八氟酞菁銅(II)(升華純):4865-60-9分子量: C32H8CuF8N8

3-(三氟甲)*氫氧銨英文名稱:3- (three f) phenyl three methyl hydroxide分子式:22.22分子量: C0H4F3NO:68254-4-

2-羥甲-3,4-二甲氧吡分子式:69.8英文名稱:2-, -3,4- two:72830-08-分子量: C8HNO3

2-氯-3-乙酰吡分子式:55.58英文名稱:2- -3- acetyl pyridine:55676-2-6分子量: C7H6ClNO

硝酸鋁九水合物分子式:375.3英文名稱:Aluminum nitrate nine hydrate:7784-27-2分子量: Al(NO3)3•9H2

吉拉爾特試劑T英文名稱:Giralt reagent T分子式:67.64分子量: C5H4ClN3O:23-46-6

PMBP(萃取劑Ⅱ)英文名稱:PMBP (extraction agent II)分子式:分子量::

聚對二氯甲分子式:277.9英文名稱:Poly two chlorine toluene:28804-46-8分子量: C6H4Cl2

八氟萘分子式:248.075英文名稱:Eight f:33-72-4分子量: C8F8

注意事項:
. 接收到大鼠角膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

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